masterThesis
Síntese, caracterização e aplicação biotecnológica do Dimetil-2-(Acridin-9-metileno) malonato
Registro en:
Mônica Vitalino de Almeida, Sinara; Bezerra de Carvalho Junior, Luiz. Síntese, caracterização e aplicação biotecnológica do Dimetil-2-(Acridin-9-metileno) malonato. 2011. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Bioquímica e Fisiologia, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2011.
Autor
ALMEIDA, Sinara Mônica Vitalino de
Institución
Resumen
O presente trabalho teve por objetivo sintetizar e caracterizar parcialmente as
propriedades luminescentes do derivado de acridina (LPSF/IP-81) e de seu conjugado
com a lectina Concanavalina A (Con A). A síntese do LPSF/IP-81 foi realizada a partir
de AC-2 e dimetilmalonato, por aquecimento à 110 °C por 24 h com rendimento de
33%. Avaliação por técnicas espectroscópicas das propriedades luminescentes do
LPSF/IP-81 mostrou que o mesmo é fotoluminescente por meio de excitação em 360
nm, e emissão por volta de 428 nm. No entanto o LPSF/IP-81 mostrou-se fracamente
quimiluminescente quando excitado a partir de reação química com peróxido de
hidrogênio. O rendimento quântico luminescente foi de 2%. LPSF/IP-81 foi conjugado
com a lectina Con A e o conjugado foi separado usando cromatografia de exclusão
molecular com Sephadex G-25. O conjugado Con A-IP-81 foi avaliado por meio da
atividade hemaglutinante, conteúdo protéico e luminescência (fluorescência ou
quimiluminescência). Análise por dicroísmo circular mostrou manutenção da estrutura
terciária da Con A após conjugação com LPSF/IP-81. Medidas de fluorescência do
conjugado Con A-IP-81 demonstraram manutenção das propriedades luminescentes do
LPSF/IP-81. Con A-IP-81 foi empregado como sonda histoquímica, onde o LPSF/IP-81
atuou como marcador luminescente, na avaliação do perfil sacarídico de superfície
celular de tumores humanos de pele e mama. A marcação dos tecidos foi avaliada em
luminômetro e microscópio de fluorescência. Os tumores de pele analisados
ceratoacantoma (1,992 ± 177 RLU), ceratose actínica (2,127 ± 332 RLU), carcinoma
epidermóide (2,920 ± 721 RLU) e carcinoma basocelular (2,934 ± 579 RLU) mostraram
uma maior expressão de resíduos de α-D-glicose/manose reconhecidos pelo conjugado
Con A-IP-81 comparado aos tecidos normais (579 ± 145 RLU). Da mesma forma que
os tecidos de mama e pele analisados pela microscopia de fluorescência mostraram
marcação positiva para o mesmo conjugado. Esses resultados indicam que o LPSF/IP-
81 pode ser usado como marcador em histoquímica Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior