doctoralThesis
Aplicações biotecnológicas da lectina de raízes de Bauhinia monandra (BmoRoL)
Registro en:
Dantas de Souza, Jayra; Cassandra Breitenbach Barroso Coelho, Luana. Aplicações biotecnológicas da lectina de raízes de Bauhinia monandra (BmoRoL). 2012. Tese (Doutorado). Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2012.
Autor
Dantas de Souza, Jayra
Institución
Resumen
Este trabalho descreve a purificação em quantidades miligramas de uma lectina de raízes
secundárias de Bauhinia monandra (BmoRoL) e suas atividades antifúngica, termiticida e
aplicação eletroquímica. A BmoRoL (6,2 mg) foi isolado por meio de fracionamento com
sulfato de amônio e cromatografia de afinidade em gel de guar. A lectina nativa foi resolvida
como uma única banda na eletroforese em gel de poliacrilamida para proteínas básicas. Sob
condições de desnaturação e redução as que apareceu como um polipeptídeo único glicosilado
de 26 kDa. A mais elevada atividade de aglutinação de BmoRoL foi encontrado com
eritrócitos de coelho tratado com glutaraldeído. BmoRoL mostrou atividade antifúngica
contra espécies fitopatogênicas de Fusarium e foi mais ativa em Fusarium solani. A lectina
também mostrou atividade termiticida sobre os trabalhadores e soldados Nasutitermes
corniger com LC50 de 0,09 e 0,395 mg de 1 mL por 12 dias. BmoRoL foi imobilizada sobre a
superfície de eletrodos de platina (Pt) e de grafite (C) e caracterizada por espectroscopia de
impedância eletroquímica (EIE), demostrando que as reações do par redox da sonda
eletroquímica para os eletrodos de Pt e C foram bloqueados devido a mudanças na
impedância da interface eletrodo/solução. Os sistemas adsorvidos com BmoRoL foram em
seguida utilizados para interação com carboidratos e glicoproteínas comerciais puras
(ovoalbumina, fetuína, peroxidase e asialofetuína) bem como interação com glicoproteínas
e/ou glicoconjugados em soros não contaminados e contaminados com Leishamania que
evidenciaram o aumento da parte real da impedância (Zre). Em conclusão, BmoRoL é uma
nova lectina antifúngica e termiticida, que poderá ser aplicada na construção de biosensores
uma vez que os sistemas eletroquímicos testados apresentaram uma resposta impedimétrica
em eletrodos de Pt e C Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico