masterThesis
Determinação do efeito mitogênico das lectinas de Cratylia mollis sobre linfócitos humanos utilizando um método colorimétrico
Registro en:
Verônica Matoso Maciel de Carvalho, Elba; Tereza dos Santos Correia, Maria. Determinação do efeito mitogênico das lectinas de Cratylia mollis sobre linfócitos humanos utilizando um método colorimétrico. 2002. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2002.
Autor
Verônica Matoso Maciel de Carvalho, Elba
Institución
Resumen
Lectinas são proteínas ou glicoproteínas que se ligam a carboidratos
específicos. Algumas delas exibem atividade mitogênica sobre linfócitos humanos in
vitro ou são tóxicas para estas células em cultura. Estas propriedades estão envolvidas
com o sítio de ligação a carboidratos. Neste trabalho foi determinada a atividade
mitogênica das lectinas de Cratylia mollis (Cra-Sephadex e Cra Iso 1) sobre linfócitos
humanos através de um ensaio colorimétrico que tem como princípio a redução do 3-
(4,5-dimetil tiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazólio (MTT), através de uma enzima mitocondrial
tetrazólio-succinato-desidrogenase, em MTT-formazan, um produto de coloração azul
escuro. As isoformas de C. mollis foram purificadas seguindo um protocolo
estabelecido. Os linfócitos foram isolados do sangue periférico humano através de um
gradiente de densidade dado pelo histopaque. Amostras de lectinas (Cra Sephadex,
Cra-Iso 1, concanavalina A, Con-A e fitohemaglutinina, PHA) em variadas
concentrações, foram utilizadas para este ensaio. Posteriormente, foi realizado um
ensaio de inibição da atividade mitogênica utilizando o carboidrato metil α-Dmanosídeo.
Os resultados obtidos foram expressos em índice de proliferação (PI, do
inglês: Proliferation Index), o qual representa a razão entre a absorbância da
proliferação na presença e na ausência de lectina. Ambas as lectinas de C. mollis são
mitogênicas. Os efeitos destas lectinas são comparáveis com aquelas lectinas
mitogênicas, como con-A e PHA. A inibição da proliferação de linfócitos, com o
carboidrato ligante, indicou que esse efeito mitogênico está envolvido com sitio de
ligação da lectina