A doença de Chagas continua a ser um problema de Saúde Pública relevante e, o único tratamento, o Benznidazol, acarreta severos efeitos colaterais e possui limitações terapêuticas. Diante disso, objetivou-se analisar o efeito do extrato acetônico (ACE) e dos ácidos fumarprotocetrárico (FUM) e protocetrárico (PRO) do líquen Cladonia verticillaris (Raddi) Fr.. contra Trypanosoma cruzi, in vitro. O extrato acetônico foi obtido mediante a uma seqüência eluotrópica de solventes orgânicos. Posteriormente foram obtidos os compostos isolados (FUM) e (PRO). Foram realizados leituras cromatográficas para confirmação e determinação do grau de pureza das substâncias. Os bioensaios foram conduzidos com formas epimastigotas e tripomastigotas sangüínea incubadas durante 72 e 24 horas respectivamente, na ausência ou presença de 75 a 300ig.mL-1das substâncias testes. Foram determinadas nesse período a IC50 e IL50. As análises foram realizadas em triplicatas em três experimentos independentes. As formas tripomastigotas revelaram maior susceptibilidade aos metabólitos secundários, com 100% de lise dos parasitas tratados com 300 ig·mL-1 de PRO, após 24 horas de incubação. A análise ultraestrutural de tripomastigotas tratadas revelaram desorganização de organelas, retração nuclear e danos ao cinetoplasto e a mitocôndria. Estas alterações foram mais evidentes nos tratamento com PRO. Concluindo, os resultados obtidos estimulam estudos futuros para elucidar os mecanismos de ação destes compostos bem como avaliar seus efeitos sobre formas amastigotas intracelulares. Estes resultados também apontam para o uso do PRO como agente potencial contra Trypanosoma cruziCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior