Tesis
Avaliação imunohistoquímica de interleucina-1, fator de necrose tumoral alfa, metaloproteinase 2 e metaloproteinase 3 na integração experimental de telas de polipropileno de alta e baixa densidade
Immunohistochemical evaluation of interleukin-1, tumor necrosis factor alpha, metalloproteinase 2 and metalloproteinase 3 in the experimental integration of high and low density polypropylene meshes
Registro en:
BRONZATTO, Elaine. Avaliação imunohistoquímica de interleucina-1, fator de necrose tumoral alfa, metaloproteinase 2 e metaloproteinase 3 na integração experimental de telas de polipropileno de alta e baixa densidade. 2016. 1 recurso online (72 p.). Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP.
Autor
Bronzatto, Elaine, 1976-
Institución
Resumen
Orientador: Cássio Luís Zanettini Riccetto Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Introdução: Telas de polipropileno (PP) têm sido cada vez mais empregadas em cirurgias para correção de prolapso de órgãos pélvicos (POP) devido às menores taxas de recidiva, quando comparadas às cirurgias sem emprego de próteses. O uso do PP na forma de sling para tratamento da incontinência urinária é considerada o padrão ouro. Quanto ao seu emprego nos POP, complicações como exposição da tela para a vagina, erosão para outros órgãos e dor local ainda são desafios relevantes. O estudo da interação do PP com o leito receptor do hospedeiro pode auxiliar a compreender esses eventos adversos e contribuir para o desenvolvimento de materiais que tenham melhor biocompatibilidade e, consequentemente, menores taxas de complicações. Objetivo: Estudar, de forma comparativa, a quantificação imunohistoquímica das metaloproteinases de colágeno (MMP-2 e MMP-3) e citocinas pró-inflamatórias (IL-1 e TNF-alfa) em implantes experimentais de telas de polipropileno de baixa densidade (16g/m2) (BD) e de alta densidade (72g/m2) (AD) no subcutâneo de ratas. Materiais e métodos: Utilizou-se 20 ratas adultas da raça Wistar, que foram submetidas ao implante de dois fragmentos de tela de polipropileno monofilamentar retangular (20mm x 10mm) no tecido subcutâneo abdominal. As telas implantadas apresentavam 16 g/m2 e 72g/m2, designadas respectivamente de baixa densidade (BD) e alta densidade (AD). As ratas foram divididas em dois grupos de 10 animais, que foram eutanasiados aos quatro e 30 dias após o implante. Foram confeccionadas lâminas que foram coradas com reagentes para identificação imunohistoquímica dos antígenos MMP-2, MMP-3, TNF-'alfa' e IL-1. Três campos de cada lâmina foram fotografados com aumento de 400 vezes e a densidade e a área percentual dos marcadores inflamatórios em questão foram quantificados através do programa AxioVison (Carl Zeiss, Alemanha). Resultados: Não foram verificadas diferenças significativas na expressão dos mediadores inflamatórios IL-1 e TNF-'alfa', porém houve aumento de IL-1 nos grupos eutanasiados após 30 dias (30 dias > 4 dias, p=0,0269). Em relação às metaloproteinase MMP-2, não houve diferença significativa entre os grupos AD e BD, porém observou-se maior expressão no grupo BD eutanasiado após 30 dias (BD: 30dias > 4 dias, p<0,0001). De forma semelhante, não foi observada diferença entre os grupos AD e BD quanto à imunoreatividade para MMP3, porém observou-se aumento significativo nos grupos eutanasiados após 30 dias (30dias > 4 dias, p=0,02). Conclusão: Não foram identificadas diferenças significativas entre as telas de alta e baixa densidade quanto à imunoreatividade para as citocinas pró-inflamatórias IL-1 e TNF-'alfa' e metaloproteinases 2 e 3 nos períodos estudados. Entretanto, observou-se aumento da imunoreatividade para IL-1, MMP-2 e MMP-3 ao longo do tempo (30 dias>4dias) em ambos tipos de implantes (AD e BD), evidenciando que a resposta inflamatória perdura de forma subaguda após o implante. Infere-se que a ocorrência de eventos adversos após implante de próteses de PP pode ser influenciada por outros fatores, não exclusivamente relacionados à densidade do material implantado Abstract: Introduction: Polypropylene (PP) meshes have been increasingly adopted for surgical treatment for pelvic organs prolapse (POP) due to its greater success when compared to site specific surgeries. PP use as a sling for urinary incontinence is considered the gold standard, however complications such as mesh exposure into the vagina, erosion into other organs and perineal pain remains a challenge to its use for POP reinforcement. The study of the interaction of these materials with the host tissue can help to understand the mechanisms evolved in PP mesh adverse events and contribute to the development of materials with better biocompatibility and consequently lower complication rate. Objective: To study the immunohistochemical quantification of collagen metalloproteinases (MMP-2 and MMP-3) and proinflammatory cytokines (IL-1 and TNF-alpha) in low density (16g/m2) (LD) and high density (72g/m2) (HD) mesh implants in a rat subcutaneous model. Materials and methods: 20 female adult Wistar rats underwent implantation of both monofilament PP meshes fragments measuring 20mm x 10mm in subcutaneous tissue of the abdominal wall. The rats were divided into two groups (10 rats each), which were euthanized after 4 and 30 days. Abdominal wall was removed en bloc and each sample was prepared for paraffin immunohistochemical analysis of the expression of MMP-2, MMP-3, TNF-'alpha' and IL-1. Three fields of each slice were photographed with magnification of 400x. For each parameter, the percentual area of each marker was quantified using AxionVision software (Carl Zeiss, Germany). Results: There were no significant differences in the quantification of IL-1 and TNF-'alpha' in LD versus HD meshes. However, IL-1 immunoreactivity increased along the time (30 days > 4 days, p=0.0269). Also, MMP-2 quantification was similar to HD and LD and both presented a significant increase along the time (30days > 4 days, p<0.0001). MMP-3 quantification also showed no difference between the HD and LD groups, but increased along the time (30 days > 4 days, p=0.02). Conclusions: There were no significant differences between high density and low density meshes in regard to the quantification of pro-inflammatory cytokines IL-1 and TNF-'alpha' and metalloproteinases 2 and 3. However, there was an increased expression of IL-1, MMP-2 and MMP-3 over time, as an evidence of a longstanding inflammatory response after PP mesh implantation. Possibly, the occurrence of adverse events following PP prosthetic implants can be influenced by other factors, not solely related to the amount of implanted material Mestrado Fisiopatologia Cirúrgica Mestra em Ciências