Orientador: Evanisi Teresa PalomariDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: A Disfunção temporomandibular (DTM) é uma expressão coletiva que engloba vários sinais e sintomas clínicos relacionados aos músculos da mastigação, articulações temporomandibulares (ATMs) e estruturas associadas. As principais queixas relatadas são ruídos e dor na região da ATM, com maior prevalência em adultos jovens, especialmente mulheres. A inflamação intra-articular é considerada uma das mais importantes fontes de dor nesta disfunção. O processo inflamatório pode se localizar na membrana sinovial, cápsula articular ou tecidos retrodiscais, e na presença de alterações degenerativas articulares recebe o nome de artrite. Assim, o laser de baixa potência (LBP) e o hialuronato de sódio de alto peso molecular (HSAPM) tem sido utilizados para o tratamento de distúrbios inflamatórios da ATM e, resultados clínicos promissores têm sido descritos. Estudos experimentais, sob a óptica da biologia celular e molecular, fazem-se necessários para melhor compreensão de seus respectivos efeitos biológicos e elaboração de protocolos clínicos seguros. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi caracterizar a ação morfológica e bioquímica da terapia com LBP e HSAPM sobre a artrite induzida na ATM. Utilizou-se 48 ratos machos, Wistar, divididos nos grupos: GA, animais com artrite induzida por meio de injeção intra-articular de adjuvante completo de Freund (CFA); GL, animais com artrite e tratados com LBP; GH, animais com artrite e tratados com HSAPM e; GHL, animais com artrite e tratados com LBP e HSAPM. Todos os experimentos ocorreram na ATM esquerda. As ATMs direitas no GA foram utilizadas como controle (GC). Foram realizadas análises morfológicas por meio de cortes corados em hematoxilina-eosina (HE), azul de toluidina e Picrosirius. Nos discos articulares, também foram realizadas análises histomorfométricas e birrefringência de fibras colágenas (microscopia de polarização). As análises bioquímicas dos tecidos da ATM foram realizadas por meio de dosagens de glicosaminoglicanos sulfatados (GAGs) e zimografia para avaliação das metaloproteinases (MMPs) 2 e 9. Os dados obtidos foram analisados por meio dos testes ANOVA one-way com pós-teste de Tukey e, Kruskal-Wallis seguido do pós-teste de Dunn. O GA exibiu acentuadas alterações morfológicas nos componentes da ATM tais como: elevada espessura do disco articular; hiperplasia da membrana sinovial e formação de pannus; reabsorção óssea da fossa mandibular; aplainamento do côndilo mandibular e presença de intenso infiltrado de células inflamatórias mononucleares no tecido subsinovial. A microscopia de polarização mostrou menor birrefringência das fibras colágenas, indicando alto grau de desorganização das fibras colágenas. Os GL, GH e GHL apresentaram menor espessura do disco articular e maior birrefringência das fibras colágenas em comparação ao GA (p<0,05). Na análise bioquímica, ficou demonstrado que a concentração de GAGs e atividades de MMP-2 e MMP-9 foram estatisticamente maiores no GA em comparação ao GC (p<0,05). Os GL, GH e GHL exibiram menores atividades das isoformas ativas da MMP-2 e MMP-9 em comparação ao GA (p<0,05). Com base nos resultados, concluiu-se que o LBP e HSAPM demonstraram efeitos anti-inflamatórios e protetores sobre as estruturas articulares. A terapia com uso simultâneo do LBP e HSAPM não foi superior aos respectivos tratamentos isoladosAbstract: Temporomandibular disorder (TMD) is a collective term that encompasses several clinical signs and symptoms related to mastigation muscles, temporomandibular joint (TMJ) and its associated structures. The main complaints reported are noise and pain at TMJ region showing higher prevalence in young adults, especially women. The intra-articular inflammation is considered one of the main sources of pain in the development of TMD. The inflammatory process may be located in the synovial membrane, articular capsule or retrodiskal tissues, and the presence of degenerative joint changes is called arthritis. Currently, Low-level laser (LLL) and high molecular weight sodium hyaluronate (HMWSH) have been used for treating TMJ disorders and promising clinical results have been reported. Experimental studies, from the perspective of cellular and molecular biology, are needed for better understanding of their respective biological effects allowing the development of secure clinical protocols. Thus, the aim of this study was to characterize the morphological and biochemical action of the therapy with LLL and HMWSH on a TMJ with induced arthritis. 48 male rats were divided into the following groups: GA, animals with arthritis induced by an intra-articular complete Freund's adjuvant (CFA) injection; GL, animals with arthritis treated with LLL; GH, animals with arthritis treated with HMWSH; and GHL, animals with arthritis treated with LLL and HMWSH. All experiments occurred in the left TMJ. The right TMJs in GA were used as controls (GC). Morphological analysis were performed using slices stained with hematoxylin-eosin (HE), toluidine blue and Picrosirius. Histomorphometric analysis and quantification of birefringence collagen fibers (polarization microscopy) were performed on the articular disc. The biochemical analysis of the TMJ tissues were performed by dosing sulfated glycosaminoglycans (GAGs) and zymography to assess the matrix metalloproteinases (MMP) 2 and 9. Data were statistically analyzed using the one-way ANOVA test with the Tukey's post hoc test and Kruskal-Wallis test followed by the Dunn's post hoc test. GA exhibited marked morphological changes in the components of the TMJ such as thickness of the joint disk; hyperplasia of the synovial membrane and pannus formation; bone resorption of mandibular fossa; flattening of the mandibular condyle and the presence of intense inflammatory infiltrate of mononuclear cells in the subsynovial tissue. The polarization microscopy showed lower birefringence of collagen fibers, indicating a high degree of collagen fibers disorganization. The GL, GH and GHL showed narrower articular disc and higher birefringence of collagen fibers compared to GA (p<0,05). In biochemical analysis, it was demonstrated that the concentration of GAGs and MMP-2 and MMP-9 activities were statistically higher in GA compared to GC (p<0,05). The GL, GH and GHL showed lower activity of the active isoform of MMP-2 and MMP-9 in comparison to GA (p<0,05). Based on the results, it is concluded that The LLL and HMWSH demonstrated anti-inflammatory and protective effects on joint structures. Therapy with concurrent use of LLL and HMWSH was not superior to the respective single treatmentsMestradoAnatomiaMestre em Biologia Celular e Estrutural