Identificación molecular de la expresión de genes relacionados a la formación de biopelículas en condiciones de cultivo estresantes en las cepas Propionibacterium SPP. y Candida Maltosa

Abstract

La expresión genética desempeña un rol importante en la comunicación celular, mecanismos de adhesión o fijación durante la formación de biopelículas. Estos genes pueden ser empleados como marcadores moleculares para monitorear la viabilidad, estabilidad y mantenimiento de las biopelículas ej. Reactores de biopelículas, biorremediaciόn, biofiltros, biotransformaciόn especialmente en condiciones de estrés que favorecerían o limitarían la formación de biopelículas. En el presente estudio se utilizaron microorganismos no patógenos de interés industrial, tales como la cepa Candida maltosa que es una fuerte formadora de biopelículas y las cepas de Propionibacterium acidipropioniciT y Propionibacterium freudenreichiiT que no son formadoras de biopelículas en condiciones de cultivo previamente reportadas. En este sentido, se optimizaron las condiciones químicas del cultivo para la producción de biopelículas con la finalidad de identificar y determinar la expresión de los genes ai2, abaI en P. acidipropioniciT y P. freudenreichiiTy ALS3, EAP1, HWP1 para C. maltosa durante la formación de biopelículas, utilizando métodos moleculares: reacción en cadena de la polimerasa (PCR), secuenciación y Hibridación In situ fluorescente de ácido ribonucleico (FISH ARN) modificado. El método FISH ARN es una herramienta que permite monitorear la expresión génica in situ de los microorganismos en las biopelículas. Los valores máximos de los índices de Formación Específica de Biopelícula (FEB) fueron reportados en P. freudenreichiiT, P. acidipropioniciT bajo condiciones estresantes (NaCl 0.6M, Glc 1.8 M y extracto de levadura 10 gL-1), para C. maltosa las condiciones del medio de cultivo no fueron modificadas, lo cual determina que estos microorganismos son fuertes formadores de biopelículas. Correlacionándose esta aseveración, se realizó la secuenciación del gen ALS3 perteneciente a C. maltosa. Finalmente se determinó la expresión de los genes ALS3 y EAP1 en C. maltosa, ai2 en P. acidipropioniciT y P. freudenreichiiT mediante el método FISH ARN modificado, encontrándose que la expresión de estos genes están relacionados con la formación de biopelículas en dichas cepas.